Ultramicrotomie

"ultramicrotomie" dans l'encyclopédie

• DÉTERMINATION DE LA STRUCTURE 3D DES PROTÉINES

  • Écrit par Beate BERSCH, Juan FONTECILLA-CAMPS et Emmanuelle NEUMANN
  • 39 026 mots
  • 5 médias

  Dans le cas d’échantillons biologiques d’épaisseur supérieure à 200 nm, comme des cellules ou des tissus biologiques, des préparations spécifiques ont émergé selon l’information recherchée : si celle-ci concerne la surface de l’échantillon, des techniques de fixation (afin de préserver les tissus), de déshydratation et de métallisation sont appliquées pour une analyse au microscope électronique à balayage ; s’il s’agit d’une information portant sur l’ultrastructure de l’échantillon dans son épaisseur, des techniques de fixation (chimique ou par congélation sous haute pression), d’inclusion en résine et de coupes par microtomie et ultramicrotomie sont appliquées pour une analyse en imagerie classique au microscope électronique à transmission (MET).

• MICROSCOPIE

  • Écrit par Christian COLLIEX, Jean DAVOUST, Étienne DELAIN, Pierre FLEURY, Georges NOMARSKI, Frank SALVAN et Jean-Paul THIÉRY
  • 108 422 mots
  • 15 médias

  Lorsqu'une haute résolution est nécessaire, la seule solution était alors de tenter de reproduire le marquage en microscopie électronique sur des cellules fixées ou coupées par cryo-ultramicrotomie. La microscopie de fluorescence en mode confocale a permis de pallier ces inconvénients puisque son principe est de pratiquer des « coupes optiques virtuelles » dans l'objet observé et de n'enregistrer que l'image de la fluorescence émise dans un plan.