CYTOMÉTRIE EN FLUX

Adjonction de la cytométrie par analyse d'images

La conception de la cytométrie en flux nécessite une contrainte principale : l'obtention de suspensions monodispersées et la résistance cellulaire à des forces dues à l'entraînement dans un flux laminaire liquide. Les cellules nécessitant leur ancrage à des supports biologiques ou artificiels pour maintenir leur viabilité et préserver leur identité phénotypique n'ont pas suffisamment bénéficié de l'apport de la cytométrie en flux, dont les contraintes techniques (qu'elles soient instrumentales ou liées à la préparation de l'échantillon) ne permettent pas de conserver l'environnement dans lequel évoluent les cellules.

La cytométrie par analyse d'images, principalement destinée aux cellules dépendantes d'un support, offre la possibilité d'analyse in vivo en l'absence de mise en suspension préalable. L'environnement de culture est alors préservé (régulation de la température, contrôle du milieu nutritif, maintien des contacts intercellulaires, absence d'altérations dues au détachement par des enzymes...). La cytométrie par analyse d'images permet d'examiner et d'inventorier des populations cellulaires de faible densité, d'étudier la cinétique des réponses cellulaires sous l'effet de molécules en fonction du temps, et autorise la répétition des mesures sur la même cellule ou le même groupe de cellules. La sélection cellulaire est réalisable soit par destruction des cellules indésirables, soit par un procédé de découpage du support sur lequel se trouve(nt) fixée(s) la (ou les) cellule(s) choisie(s) pour ses (leurs) caractéristiques.